ⅠNsearbhag ucleiciro-ràdh
Tha searbhag niuclasach air a roinn ann an searbhag deoxyribonucleic (DNA) agus searbhag ribonucleic (RNA), am measg sin tha RNA air a roinn ann an RNA ribosomal (rRNA), teachdaire RNA (mRNA) agus gluasad RNA (tRNA) a rèir a diofar ghnìomhan.Tha DNA sa mhòr-chuid anns an niuclas, mitochondria agus cloroform, agus tha RNA air a chuairteachadh sa mhòr-chuid anns an cytoplasm.Mar bhunait stuth airson abairt gine, tha àite air leth cudromach aig às-tharraing searbhag niuclasach ann an rannsachadh bith-eòlas moileciuil agus breithneachadh clionaigeach moileciuil.Bheir dùmhlachd agus purrachd às-tharraing searbhag niuclasach buaidh dhìreach air PCR às deidh sin, sreath, togail vectar, cnàmhadh enzyme agus deuchainnean eile.
Ⅱ Modh às-tharraing agus glanadh searbhag niuclasach
① Modh às-tharraing phenol/cloroform
Tha toirt a-mach phenol / cloroform na dhòigh clasaigeach airson às-tharraing DNA, a bhios gu ìre mhòr a’ cleachdadh dà fhuasgladh organach eadar-dhealaichte gus na sampallan a làimhseachadh, a’ sgaoileadh searbhag niuclasach stèidhichte air DNA anns an ìre uisge, lipids anns an ìre organach, agus pròtanan eadar an dà ìre.Tha na buannachdan aig an dòigh seo de chosgais ìosal, purrachd àrd agus deagh bhuaidh.Is e na h-eas-bhuannachdan obrachadh iom-fhillte agus ùine fhada.
② Trizol dòigh
Tha modh Trizol na dhòigh clasaigeach airson às-tharraing RNA.Tha an dòigh Trizol air a roinn ann an ìre uisgeach agus ìre organach às deidh centrifugation le cloroform, anns a bheil an RNA air a sgaoileadh anns an ìre uisgeach, tha an ìre uisgeach air a ghluasad gu tiùb EP ùr, gheibhear sileadh às deidh isopropanol a chuir ris, agus an uairsin glanadh ethanol.Tha an dòigh seo freagarrach airson tarraing RNA bho fhigheagan bheathaichean, ceallan agus bacteria.
③ Modh purchaidh colbh centrifugal
Faodaidh dòigh glanaidh colbh Centrifuge adsorbachadh DNA gu sònraichte tro stuthan sònraichte sileaconach matrix asorption, fhad ‘s as urrainn RNA agus pròtain a dhol seachad gu rèidh, agus an uairsin a’ cleachdadh PH ìosal salainn àrd gus searbhag niuclasach a thoirt còmhla, elution luach PH àrd salainn ìosal gus searbhag niuclasach a sgaradh agus a ghlanadh.Is e na buannachdan dùmhlachd glanaidh àrd, seasmhachd àrd, gun fheum air fuasgladh organach, agus cosgais ìosal.Is e an ana-cothrom gum feum e centrifuged ceum air cheum, barrachd ceumannan obrachaidh.
④ Modh grìogagan magnetach
Is e an dòigh grìogagan magnetach an sampall clò cealla a sgoltadh tron lysate, an searbhag niuclasach a leigeil ma sgaoil san sampall, agus an uairsin tha na moileciuilean searbhag niuclasach air an cuir a-steach gu sònraichte air uachdar a’ ghrìog magnetach, fhad ‘s a tha neo-chunbhalachd leithid pròtainean agus siùcaran air am fàgail a-steach. an leaghan.Tro na ceumannan de sgaradh clò cealla, ceangal grìogagan magnetach le searbhag niuclasach, nighe searbhag niuclasach, elution searbhag niuclasach, msaa, gheibhear searbhag niuclasach fìor-ghlan mu dheireadh.Is e na buannachdan obrachadh sìmplidh agus cleachdadh ùine ghoirid, gun fheum air centrifugation ceum.Tha riatanasan teicnigeach ìosal aige agus faodaidh e obrachadh fèin-ghluasadach agus mòr a thoirt gu buil.Tha an cothlamadh sònraichte de ghrìog magnetach agus searbhag niuclasach a’ dèanamh an searbhag niuclasach a chaidh a thoirt a-mach le dùmhlachd àrd agus purrachd.Is e an ana-cothrom gu bheil prìs a ’mhargaidh gnàthach gu ìre mhath daor.
⑤ Dòighean eile
A bharrachd air na ceithir dòighean gu h-àrd, tha sgàineadh goil, modh salann dùmhail, dòigh glanaidh anionic, dòigh ultrasonic agus modh enzymatic, msaa.
Ⅲ Seòrsa às-tharraing nucleic acid
Tha an àrd-ùrlar Direct PCR san t-saoghal aig Foregene, àrd-ùrlar Iomallach RNA dà-cholbh (DNA a-mhàin + RNA a-mhàin).Tha na prìomh thoraidhean a’ toirt a-steach innealan aonaranachd DNA / RNA, sreath ath-bheachdan deuchainn-lann moileciuil PCR agus Direct PCR.
① Iomlan às-tharraing RNA
Tha sampallan às-tharraing RNA iomlan a’ toirt a-steach fuil, ceallan, stuthan beathach, lusan, bhìorasan, msaa. clonadh moileciuil, Dot Blot agus deuchainnean eile.
Co-cheangailte ri ForegeneInnealan Iomallach RNA
Kit Iomallach RNA Iomlan bheathaichean--Thoir a-mach gu sgiobalta agus gu h-èifeachdach RNA iomlan fìor-ghlan agus àrd-inbhe bho dhiofar stuthan beathach.
Cell Iomlan RNA Kit Iomallach--Faodar RNA iomlan fìor-ghlan agus àrd-inbhe fhaighinn bho dhiofar cheallan cultarach ann an 11 mionaidean.
Lusan Kit Iomallach Iomlan RNA--Thoir a-mach gu sgiobalta RNA iomlan de chàileachd àrd bho shamhlaichean planntrais le susbaint ìosal polysaccharide agus polyphenol.
Kit Iomallach RNA viral-- Dèan dealachadh gu sgiobalta agus glan RNA viral bho shamhlaichean leithid plasma, serum, lionntan bodhaig gun cheallan agus supernatants cultar cealla.
② às-tharraing genomic DNA
Tha sampallan às-tharraing DNA genomic a’ toirt a-steach ùir, feces, fuil, ceallan, maothran bheathaichean, lusan, bhìorasan, msaa. -throughput sreath agus deuchainnean eile.
Co-cheangailte ri ForegeneInnealan aonaranachd DNA
Kit Iomallach DNA Maine Beathach-- Thoir a-mach agus glanadh gu sgiobalta DNA genomic bho ghrunn stòran, leithid clò bheathaichean, ceallan, msaa.
Fuil DNA Midi Kit (1-5ml)-- Glan gu sgiobalta DNA genomic àrd-inbhe bho fhuil anticoagulated (1-5ml).
Kit Iomallach DNA cairt swab buccal / FTA-- Glan gu sgiobalta DNA genomic àrd-inbhe bho swab buccal / sampallan Cairt FTA.
Kit Iomallach DNA lusan-- Glan gu sgiobalta agus faigh DNA genomic àrd-inbhe bho shamhlaichean planntrais (a ’toirt a-steach polysaccharides agus sampallan planntrais polyphenol)
③ às-tharraing plasma
Is e seòrsa de DNA moileciuil beag cruinn ann an ceallan a th’ ann am plasmid, a tha na neach-giùlain cumanta airson ath-chur DNA.Is e an dòigh air às-tharraing plasmid RNA a thoirt air falbh, plasmid a sgaradh bho DNA genomic bacterial, agus pròtain agus neo-chunbhalachd eile a thoirt air falbh gus plasmid caran fìor-ghlan fhaighinn.
Kit Mini Plasmid Coitcheann-- Glan gu sgiobalta DNA plasmid àrd-inbhe bho bacteria cruth-atharraichte airson deuchainnean bith-eòlas moileciuil àbhaisteach leithid cruth-atharrachadh agus cnàmhadh enzyme
④ Seòrsan às-tharraing eile, às-tharraing miRNA, msaa.
Kit Iomallach bheathaichean miRNA-- Thoir a-mach gu sgiobalta agus gu h-èifeachdach pìosan beaga RNA de 20-200nt miRNA, siRNA, snRNA bho dhiofar stuthan agus ceallan bheathaichean
Ⅳ Riatanasan airson toradh às-tharraing agus glanadh searbhag niuclasachs
① Gus dèanamh cinnteach à ionracas prìomh structar searbhag nucleic.
② Lùghdaich eadar-theachd pròtainean, siùcaran, lipids agus macromolecules eile
③ Cha bu chòir fuasgladh organach no dùmhlachd àrd de ianan meatailt a bhith ann a chuireas casg air an enzyme ann an sampallan searbhag niuclasach.
④ Bu chòir cuir às do RNA agus truailleadh searbhag niuclasach eile nuair a thathar a’ toirt a-mach DNA, agus a chaochladh.
Ùine puist: Samhain-24-2022
